ELISA viruksen hepatiittia varten

9. maaliskuuta 2017, 16:25 Asiantuntijartikkelit: Nova Vladislavovna Izvochkova 0 3,608

Viruksen hepatiitin havaitsemiseksi kehossa lääke käyttää laajasti entsyymi-immunomääritystä, joka perustuu antigeenien pitoisuuden ja tyypin havaitsemiseen käyttämällä vasta-aineita ja entsyymejä. Se suoritetaan vaiheittain, laboratoriotutkimuksella, ja siinä on tarkat tiedot. Vasta-aineiden määrästä ja luokasta riippuen ELISA: ta käyttävän entsyymin väri ja konsentraatio ja siten lääkäri diagnoosi taudin, muuttuu.

Mikä on ELISA?

Viruksen hepatiitin esiintyminen potilaan kehossa määritetään käyttämällä serologista verianalyysimenetelmää HCV-viruksen ja sen osoittavien markkereiden (elinten ja vasta-aineiden) läsnä ollessa. Entsyymiin liitetty immunosorbenttimääritys (ELISA) tutkii erilaisia ​​viruksia, pienimolekyylipainoisia yhdisteitä, makromolekyylejä, niiden kvalitatiivisia ja kvantitatiivisia indikaattoreita käyttäen reaktion ilmentymistä niiden antigeeneihin. Voit tehdä tämän käyttämällä entsyymiä merkin rekisteröintiä varten. Sitä käytetään yhä useammin lääketieteessä, koska ELISA löytää selvästi määritellyt antigeenit sekoittamatta niitä muihin, sillä on suuri herkkyys viruksen hepatiittia vastaan.

Tällaisen diagnoosin haittana on kyvyttömyys tunnistaa taudin syy, koska menetelmä osoittaa vain kehon immuunijärjestelmän reaktion. Aiemmin tehty rokotus vaikuttaa analyysin tuloksiin. 8 tuntia ennen analyysia on suositeltavaa pidättäytyä syömästä, nikotiinista, alkoholista. ELISA-testin perusta on kehon entsymaattinen ja immuunivaste virukselle. Biologiset molekyylit sitoutuvat soluun ja sen elementteihin, mikro-organismeihin, havaitsevat viruksen, sitten työstävät entsyymejä, joiden avulla voit ilmaista immuunivasteen näkyvässä ja mitattavissa olevassa parametrissa.

Indikaatiot analysointia varten

Viruksen hepatiitti voi aiheuttaa syöpää ja maksakirroosia. Ajankohtaisen diagnoosin merkitys on kiistaton. Ensisijainen diagnoosimenetelmä on ELISA-testi, joka määrittää tarkasti HCV-viruksen (IgM ja IgG) läsnäolon ja sen hivenaineiden aktiivisuuden. Virustapahtuman pakolliset testit:

1. Ihmiset, joilla on riskiryhmät (huumeriippuvaiset, aids-ihmiset, lääketieteen ja lainvalvontaviranomaisten työntekijät).
2. Ihmiset, joilla on akuutti tai krooninen hepatiitti.
3. Raskaana olevat ja raskaana olevat naiset.

ELISA tunnistaa taudin missä tahansa vaiheessa. Analyysin tulokset ovat keskimäärin valmiita 2 päivän kuluessa.

Kriteerit, jotka määrittävät analyysin tärkeyden

ELISA-testi määrittää luokan IgG, IgM, IgA vasta-aineiden läsnäolon. Viruksen hepatiittia diagnosoitaessa lääkäri ei kiinnitä huomiota niiden tyyppiin, koska HCV-viruksen tällainen ilmentyminen osoittaa jo taudin akuutin tai kroonisen vaiheen. Taudin alkuvaiheessa IgM-taso nousee (5 päivää infektion jälkeen); 15.-20. päivänä IgG-vasta-aineet näkyvät ja voivat jäädä ihmisen veressä pitkään jopa parannuksen jälkeen; IgA - esiintyy 10-14 päivän kuluttua, vähenee hoidon jälkeen.

Jos IgG ja IgA havaitaan lääkkeiden käytön jälkeen ja niiden taso pysyy samana - kantaja on krooninen hepatiitti. Testauksen tärkeä kriteeri on käytettävissä olevien vasta-aineiden luokan selkeä määrittely ja niiden määrä. Tämän perusteella voit tietää paitsi taudin läsnäolosta myös sen kehitysvaiheesta. Tällaisten elementtien havaitseminen potilaan veressä mahdollistaa asianmukaista ja oikea-aikaisen hoidon vakavampien seurausten estämiseksi.

Miten se tehdään?

Määritä suora eikä suora ELISA-testi. Vaiheet suorat:

1. Biologisen materiaalin kerääminen ja sijoittaminen erityisiin reikiin.
2. 15-30 minuutin kuluessa antigeenit on kiinnitetty kaivojen pintaan.
3. Lisätään vasta-aineita kuoppiin löydettyyn antigeeniin. Kaikki jätettiin 1–5 tunnin ajaksi.
4. Poista irralliset antigeenit (kaivojen sisältö kaatamalla).
5. Huuhtele kuopat erityisellä ratkaisulla.
6. Lisää entsyymiliuos kuoppiin. Jätä 30 minuuttia - 1 tunti.
7. Kolorimetrian käyttö (värin havaitseminen ja kuopan sisällön värien keskittäminen, vertailu indikaattoreihin, jotka ovat suoraan verrannollisia viruksen pitoisuuteen).

Käyttö epäsuoran ELISAn diagnosointiin antaa tarkemman tuloksen.

Epäsuora ELISA-menetelmä suoritetaan käyttämällä leimattuja vasta-aineita löydetyille antigeeneille ja sen jälkeen lisätään leimattuja vasta-aineita. Ensinnäkin potilas ottaa veren ja leviää kuoppiin 15-30 minuutin ajan. (vasta-aineet kiinnitetään rei'illä). Sitten merkitään leimatut vasta-aineet 1 - 5 tuntia (muodostuu vasta-aineiden ja antigeenien välinen yhteys - immuunikompleksi). Seuraavaksi kaivoista kaadetaan kiinnittämättömiä mikroelementtejä ja pestään erityisellä ratkaisulla. Seuraavassa vaiheessa laboratorioteknikko lisää kuoppiin merkityt hivenaineet 15-30 minuutin ajan. (tämä sitoutuu leimaamatta leimattua kompleksin "vasta-aine-vasta-aine-antigeeni" muodostumisen kanssa. Ylimääräinen (löysä) poistetaan uudelleen tyhjennyksen ja liuoksen pesun aikana. Seuraavaksi on entsyymi, joka muuttaa väriä 5-30 minuutissa. verrataan aukkoihin ja väritietoihin taulukon indikaattorien tietoihin. Epäsuora ELISA on tarkempi.

Mitä ELISA osoittaa viruksen hepatiitille?

Immunomääritys sallii infektion läsnäolon havaitsemisen (kaikenlaiset hepatiittivirukset, HIV, herpes, syfilis, sytomegalovirus, tuhkarokko, vihurirokko, sikotauti, Epstein-Barrin virus), on autoimmuunisairauksien, syöpäsolujen, merkki. Ilmaisee lisääntymistoimintojen rikkomukset (testosteronin, prolaktiinin, estradiolin ja progesteronin muutokset), kilpirauhasen toimintahäiriöt, helmintitartunta, klamydia. Tehokas havaitsemaan ureaplasmoosi, hinkuyskä, Dange-virus, Länsi-Niilin virus, Borrelia. Määritelmien luettelo on suuri, sisältää monia kohteita.

Tulosten vahvistaminen

HCV-viruksen antigeenin määrittäminen ELISA: lla antaa 98%: n tarkkuuden. Sitä käytetään myös biologisen materiaalin uudelleentarkasteluun fuzzy aiempien indikaattoreiden avulla. IgM-antigeenien läsnäolo ei ole akuutin hepatiitin indikaattori ja vaatii lisätutkimusta. Kun ELISA-testi toistetaan, tulokset vastaavat 90–100%. Jos ero on vähäinen, keskiarvo otetaan indikaattoriksi. Parhaan mahdollisen tarkkuuden vuoksi lääkärit suosittelevat rinnakkain suorittamaan veren biokemiallisen analyysin. Voit testata tuloksia entsyymi-immunomäärityksen jälkeen käyttämällä muita diagnostisia menetelmiä.

Viruksen hepatiitin tutkiminen ife-menetelmällä

ELISA viruksen hepatiitin diagnosoinnissa. Entsyymi-immunomääritysominaisuudet

Viruksen hepatiitin spesifinen laboratoriotutkimus perustuu immunokemiallisten ja molekyylibiologisten tutkimusmenetelmien käyttöön. Tärkeimmät immunokemialliset menetelmät ovat radioisotooppi tai radioimmuuni (RIA) ja immunomääritys (ELISA). Immunokemialliset diagnostiikkamenetelmät perustuvat antigeenin - vasta-aineen erityiseen vuorovaikutukseen, jonka jälkeen kompleksi tunnistetaan erityismerkkien avulla. Yleisin entsyymi-immunomääritys.

Ensimmäiset raportit entsyymi-immunomäärityksen käytöstä. menetelmänä kaikkien aineiden määrittämiseksi julkaistiin vuonna 1971 samanaikaisesti kaksi tutkimusryhmää - V. Van Weemen, A. Schuurs ja E. Engvall, P. Perlmann. Entsyymi-immunomääritys perustuu seuraavaan periaatteeseen: kiinteässä faasissa, joka käyttää pääasiassa polystyreenitabletin kaivojen pintaa, infektoivan aineen antigeeni tai vasta-aine (usein vasta-aineiden seos) havaittaviin antigeeneihin on kiinteä. Tätä antigeeniä tai vasta-aineita, jotka on kiinnitetty kiinteään faasiin, kutsutaan immunosorbentiksi.

Immunosorbentin ja testiseerumin inkuboinnin seurauksena havaittavan aineen läsnä ollessa ne sitoutuvat antigeeni-vasta-ainekompleksiin. Pesuvaiheen jälkeen, jolloin sitoutumattomat antigeenit ja vasta-aineet poistetaan, inkuboidaan konjugaatin kanssa. Konjugaattina HBsAg: n detektoimiseksi käytetään anti-HBs: ää, C-hepatiittiviruksen vasta-aineiden havaitsemiseksi - ihmisen immunoglobuliinien vasta-aineita (antivirus konjugaatti), jotka on merkitty piparjuuriperoksidaasilla. Tämän inkuboinnin tuloksena tapahtuu kiinnittyminen jo olemassa oleviin antigeenikomplekseihin - lisätyn konjugaatin vasta-aine. Sitoutumattoman konjugaatin (pesu) poistamisen jälkeen substraatti viedään kuoppiin. Peroksidaasikonjugaattia käytettäessä vetyperoksidia käytetään substraattina yhdessä indikaattorin kanssa, jota käytetään useimmiten ortofenyleenidiamiinina (OPD) tai tetrametyylibentsidiininä (TMB). Tulos arvioidaan fotometrisesti.

Entsyymi-immunomääritysmenetelmän analyyttisten ominaisuuksien laadulle ja luotettavuudelle on tunnusomaista joukko kriteerejä, joihin kuuluvat herkkyys, spesifisyys, tarkkuus ja toistettavuus.

Herkkyys on aineen vähimmäismäärä, joka voidaan havaita entsyymi-immunomäärityksellä. Tässä tapauksessa tämän menetelmän herkkyyden alaraja on näytteen sisältämän testiaineen pitoisuus, joka vastaa määrityksen pienintä positiivista tulosta, joka on tilastollisesti merkittävästi erilainen kuin tarkoituksellisesti negatiivisten näytteiden indikaattorit. IFTS: n herkkyys riippuu useista olosuhteista, jotka liittyvät sekä testijärjestelmän suunnitteluun (immunosorbentin affiniteetti, uuttamis- ja puskurijärjestelmien laatu) että rekisteröintimenetelmän resoluutio ja tarkkuus.

Spesifisyys - kyky tunnistaa tarkasti komponentit, joiden määrittämiseksi tämä entsyymi-immunomääritys on suunniteltu. ELISA: n spesifisyys määräytyy pitkälti vasta-aineiden tai antigeenien (eli immunosorbenttina käytetyn koostumuksen) ja läheisesti toisiinsa liittyvien yhdisteiden ristireaktiolla sekä inkubointiväliaineen koostumuksella (matriisivaikutus).

Oikaisu - saman kontrollinäytteen toistettujen määritysten tulosten keskiarvon ja mitatun parametrin todellisen arvon vastaavuus. ELISA-määrityksen määritys riippuu testijärjestelmän ja kontrollinäytteen laadusta. Hyvien immunomääritysten testausjärjestelmien oikeellisuutta osoittavat indikaattorit ovat välillä 90-110%. Biolääketieteellisen tutkimuksen erityispiirre ELISA: ssa on se, että ei ole mahdollista määrittää tarkkaa arvoa, ja siksi useiden asiantuntijalaboratorioiden keskiarvo on todellinen arvo. Oikeuden tilastollinen kriteeri on aritmeettinen keskiarvo ja sen poikkeaman aste todellisesta arvosta prosentteina ilmaistuna.

Jäljitettävyys - testijärjestelmän kyky näyttää samat arvot saman näytteen toistuvilla tutkimuksilla. Toistettavuus riippuu sekä reaktion aikana tapahtuneista satunnaisvirheistä (virheistä) että testijärjestelmien laadusta ja tulosten tallennusmenetelmän tarkkuudesta. Uskotaan, että saman yrityksen samojen kontrollinäytteiden toistettavuus eri laboratorioissa ei saisi ylittää 15%: n vaihteluvälin arvoa.

Viruksen hepatiittimarkkereiden määrittämiseksi on olemassa useita spesifisiä ELISA-menetelmiä: a) suora entsyymi-immunomääritys; b) epäsuora entsyymi-immunomääritys; c) kilpaileva esto; c) "ansa" tai "sieppaus" -menetelmä.

Molekulaarisista biologisista menetelmistä viruksen hepatiitin diagnosoimiseksi käytetään yleisemmin polymeraasiketjureaktiota ja hybridisaatiota. Nämä menetelmät, erityisesti PCR, mahdollistavat hyvin pienten määrien spesifisen viruksen DNA: n tai RNA: n havaitsemisen ja siten tuomarin replikoinnin ja joissakin tapauksissa replikaatiotoiminnan.

C-hepatiitti-verikoe

C-hepatiitti on yksi yleisimmistä maksasairauksista, joita esiintyy, kun se on infektoitu C-hepatiittiviruksella (HCV), joka pääsee kehoon ensisijaisesti, kun se joutuu kosketuksiin tartunnan saaneen henkilön veren kanssa. Kroonista ja akuuttia C-hepatiittia esiintyy 70–80 prosentissa akuutista C-hepatiittia sairastavista potilaista ei ole taudin oireita, vain joissakin tapauksissa infektion jälkeen jonkin aikaa ilmenee taudin ilmenemismuotoja, jotka ilmenevät väsymyksessä, vatsakipussa, ruokahaluttomuudessa, pimeydessä virtsa, oksentelu, pahoinvointi, ulosteet, keltaisuus, nivelkipu. Oireet ilmenevät yleensä 6-7 viikkoa infektion jälkeen, mutta taudin oireiden alkamisaika vaihtelee 2 viikosta kuuteen kuukauteen. Jos edellä mainitut oireet ilmenevät, sinun on kuultava tartuntatautien lääkäriä ja pidettävä C-hepatiittitutkimus. Hepatiitin diagnosointi, joka suoritetaan ajoissa, voi havaita taudin varhaisessa vaiheessa ja lisätä merkittävästi toipumismahdollisuuksia.

Kun hepatiitti C -testi on suunniteltu

Tilanne, jossa vaaditaan C-hepatiittitesti:

• raskauden ja perhesuunnittelun aikana;
• potilailla, joilla on kroonisen tai akuutin hepatiitin oireita;
• henkilö on vaarassa. Nämä ovat lääketieteellisiä työntekijöitä, vankilassa olevia henkilöitä, lainvalvontaviranomaisia, huumeita käyttäviä henkilöitä, paljon seksuaalisia kumppaneita, aidsia, hemodialyysiä ja muita.

Hepatiitti C -analyysin valmistelu

Erityistä C-hepatiittianalyysin valmistelua ei tarvita. Analyysiä varten veri otetaan laskimoista tyhjään vatsaan, samaan aikaan vähintään kahdeksan tunnin pitäisi kulua viimeisen aterian jälkeen.

C-hepatiitti-ELISA-määritykset

Ensimmäinen analyysi, joka on yleensä määrätty hepatiitti C-ELISA-testin diagnosoimiseksi (entsyymiin liitetty immunosorbenttimääritys). C-hepatiitti-ELISA-määritykset mahdollistavat C-hepatiittiviruksen (anti-HCVAb) vasta-aineiden havaitsemisen veressä. Jos ELISA-testin tulos on positiivinen, se osoittaa, että elimistö on kosketuksissa hepatiitti C -viruksen kanssa, mutta 40% ihmisistä, joilla on positiivinen ELISA, ei havaitse virusta veressä. Tätä ilmiötä kutsutaan vääräksi positiiviseksi tulokseksi. Myös ELISAn avulla tarkastetaan luovuttajan verta.

C-hepatiitin RIBA

Hepatiitti C: n RIBA-analyysiä käytetään vahvistamaan positiivinen ELISA-tulos. Rekombinanttinen immunoblottausmenetelmä (RIBA) on tarkempi tutkimus C-hepatiittiviruksen vasta-aineiden läsnäolosta, mutta C-hepatiittiviruksen esiintyminen kehossa ei myöskään määritä positiivista tulosta, vaan ainoastaan ​​vahvistaa vasta-aineiden läsnäolon.

C-hepatiitti-PCR-testit

Hepatiitti C-virusten esiintymisen havaitsemiseksi veressä (HCV RNA) ja diagnoosin tekemiseksi ne käyttävät useimmiten analyysiä polymeraasiketjureaktion (PCR) menetelmällä. Tässä tutkimuksessa voidaan havaita suurella tarkkuudella jopa pienen määrän virusta läsnäolossa veressä. C-hepatiitin PCR-analyysi voi paljastaa viruksen läsnäolon jo 5 päivää infektion jälkeen, kauan ennen vasta-aineiden esiintymistä. Kun PCR-analyysin tulos on positiivinen, se tarkoittaa aktiivisen infektion läsnäoloa.

PCR-analyysissä on tällaisia ​​vaihteluja:

• kvantitatiivinen PCR, joka sallii paitsi viruksen läsnäolon toteamisen myös viruksen kuormituksen (viruksen määrä). Tämä indikaattori on erittäin tärkeä hoidon tehokkuuden määrittämiseksi;
• genotyyppi, joka määrittää C-hepatiittiviruksen genotyypin, mikä on tärkeää hoidon keston ja taktiikan määrittämiseksi. C-hepatiittiviruksen genotyyppejä on yli 10, mutta kliinisessä käytännössä riittää, että määritellään viisi yleisimpiä tyyppejä: 1a, 1b, 2,3a / 3b.

Kvantitatiivinen PCR-analyysi suoritetaan:

• kvalitatiivisella positiivisella testillä C-hepatiittiviruksen RNA: n läsnäolosta seerumissa;
• tarkan arvioinnin hoidon tehokkuudesta;
• määrittää potilaan hoidon taktiikka.

C-hepatiitin vakavuuden ja veressä olevan viruksen määrän välillä ei ole suoraa yhteyttä. Viruksen pitoisuus vaikuttaa taudin tarttuvuuteen, eli mitä suurempi on viruksen määrä potilaan veressä, sitä suurempi on riski, että virus leviää esimerkiksi seksuaalisen kontaktin tai äidin ja lapsen välityksellä. Hoidon tehokkuus riippuu myös viruksen pitoisuudesta. Hoidon aikana suotuisa tekijä on alhainen viruksen kuormitus, ja erittäin korkea on epäsuotuisa.

Genotyyppianalyysi tehdään:

• kvalitatiivisella positiivisella testillä C-hepatiittiviruksen RNA: n läsnäolosta seerumissa;
• tarkan arvioinnin hoidon tehokkuudesta;
• määrittää potilaan hoidon taktiikka;
• ennustaa tartuntaprosessin kronisoinnin;
• taudin etenemisen määrittämiseksi.

Viruksen genotyypin havaitseminen on erittäin tärkeää hoidon keston määrittämiseksi, mikä on tärkeää, koska interferonilla on laaja sivuvaikutusten valikoima ja alhainen potilastoleranssi.

Hepatiitti C: n dekoodausanalyysi

Normaalisti viruksen RNA, niiden vasta-aineet ja antigeenit ovat täysin poissa. Vasta-aineiden läsnäolo veressä osoittaa kroonisen tai akuutin hepatiitti C: n läsnäolon tai toipumisjakson. Jos veressä on HCV-RNA: ta, joka määritetään PCR-analyysillä, tämä osoittaa viruksen läsnäolon veressä.

Väärän testitekniikan, kuljetuksen ja veren poikkeavuuksien perusteella PCR-analyysi voi joskus osoittaa vääriä positiivisia tuloksia. ELISA: n ja RIBA: n analyysit taudin alkuvaiheessa, kun elimistö ei ole vielä tuottanut riittävää määrää vasta-aineita, voi näyttää väärän negatiivisen tuloksen.

Jos hepatiitti C: n testin salaustaessa saadaan positiivisia tuloksia, on tarpeen ottaa yhteyttä tartuntatautien lääkäriin ja gastroenterologiin saadakseen lisää diagnoosia ja hoitoa.

Segmentoidut neutrofiilit laskivat

Lapsen verihiutaleet ovat normaaleja, kohollaan laskettuja

Kilpirauhasen stimuloiva hormoni TGT

Hepatiitin diagnosointi

Hepatiitin esiintymistä elimistössä ei voida välittömästi määrittää, koska taudin inkubointiaika voi kestää jopa neljä viikkoa. Kun ensimmäiset taudin merkit tulevat esiin, veren koostumuksessa esiintyy radikaaleja muutoksia organismissa: biokemiallinen analyysi kertoo vakavasta terveysongelmasta ja patogeenisen viruksen esiintymisestä. Lopullisen diagnoosin tekemiseen ei kuitenkaan riitä, että luovutetaan veren hepatiittia varten, samoin kuin yksityiskohtainen diagnoosi hepatiitista.

Hepatiitin laboratorio diagnoosi

On toivottavaa, että se suoritetaan inkubointiajan päätyttyä, jotta lääkäri, jolla on erittäin tarkka tarkkuus, voi määrittää kehossa olevan maksasairauden. Muussa tapauksessa määrätty hoito ei anna toivottua terapeuttista vaikutusta ja jopa pahentaa vallitsevaa kliinistä kuvaa.

A-hepatiitin diagnoosi

Tyypillisesti hepatiitti A: n diagnoosi alkaa potilaan yksityiskohtaisesta kyselystä ja useiden testien nimittämisestä, jotka on suoritettava mahdollisimman pian. Tämä on:

• biokemiallinen verikoe;
• täydellinen verenkuva;
• PCR-menetelmä;
• ELISA;
• hyytymisen.

Jos Botkinin tauti etenee, biokemiallisen vereanalyysin tulosten mukaan havaitaan epänormaali bilirubiini-, AlAT- ja AsAT-hyppy, tymolinäyte. Lisäksi tuotetaan spesifistä anti-HAV-IgM: ää, jotka ovat kiistaton tosiasia hepatiitti A: n läsnäololle.
Yleensä veren analyysi määräytyy leukosyyttien vähenemisen, ESR: n ja lymfosytoosin hypyn vuoksi. Ja kuitenkin luotettavin on PCR-menetelmä, joka määrittää patogeenisen viruksen RNA: n indikaattorin.
Lisäksi lääkäri tutkii taudin oireet, minkä jälkeen se voi tehdä lopullisen diagnoosin ja läpäistä tehokkaimman hoidon. Instrumentaalisen tutkimuksen tarve on erittäin harvinaista. Onnistuneen konservatiivisen hoidon jälkeen potilaan sairaalahoidossa ja karanteenissa lopullinen elpyminen odottaa ja A-hepatiitti ei toistu uudelleen.

B-hepatiitin diagnoosi

B-hepatiittiviruksen esiintymisen määrittämiseksi on myös mahdollista tehdä laboratoriokokeiden tulosten mukaan, ja tästä syystä ensimmäinen asia on luovutettava veri hepatiitille. Luonnollisesti patogeenisellä viruksella on kolme pääantigeeniä - HBsAg, HBcAg ja HBeAg, joihin kehossa tuotetaan vasta-aineita. Tämän kliinisen kuvan tärkein piirre on ELISA - ELISA, joka paljastaa vain tietyt hepatiitti B: n markkerit.
Heti on selvennettävä, että antigeeni HBsAg esiintyy veressä jo ennen hepatiitin ensimmäisiä oireita ja että se määritetään luotettavasti icteric-jaksossa. Negatiivinen testi ei kuitenkaan sulje pois hepatiitti B: n läsnäoloa, ja siksi se vaatii yhtä tehokkaan polymeraasiketjureaktion (PCR) menetelmän käyttöä.
Jos epäilet, että B-hepatiitti on pakollinen, on biokemiallinen verikoe, jota suositellaan antamaan ensimmäisessä paikassa. Maksan biopsian suorittamista ja peritoneaalisten elinten ultraääniä käsitellään erikseen, mutta kun taudin historia on hyvin selvä, kliinisiä tutkimuksia ei tarvita.

Maksan echogrammi autoimmuunisessa hepatiitissa kroonisen hepatiitin vaiheessa

C-hepatiitin diagnoosi

Tämän diagnoosin tekemiseksi ei riitä, että luovutetaan verta hepatiitille, koska virus voi vallita kehossa piilevässä muodossa. Pääasialliset laboratoriokokeet ovat kuitenkin kaikki edellä esitetyt analyysit sekä maksan biopsian lisätehokkuus. Tämä biologisen materiaalin mikroskooppinen tutkimus (meidän tapauksessamme maksakudos) määrittää patologisen prosessin ja kudosfibroosin laajuuden. Materiaalinäytteenotto suoritetaan paikallispuudutteessa, tällaisen menettelyn komplikaatiot ovat erittäin harvinaisia ​​lääketieteellisessä käytännössä.
Jos epäillään C-hepatiittia, pääasiallinen kliinisen tutkimuksen menetelmä on peritoneaalisten elinten ultraääni. Syy on yksinkertainen: tauti ilmenee usein näkyvän muutoksen seurauksena maksassa, sen rakenteen ja koon muutoksissa. Näin voit määrittää:

• maksan, pernan, haiman ja sappirakon koko;
• patologiset muutokset näissä elimissä;
• yleinen verenkierto peritoneaalisissa elimissä;
• optimaalinen alue maksan biopsian suorittamiseksi.

Tämä kliinisen tutkimuksen menetelmä määrittää elimen kaikki fokaaliset patologiat mikroskooppisella tasolla. Jos maksa on näytetty harmaassa asteikossa, vaaditaan välitöntä biopsiaa, koska harmaa väri visualisoi ihmisen suodattimen kudokset.

Hepatiitin ehkäisy

Koska tauti ei ilmene välittömästi, se ei ole kaukana kaikista kliinisistä kuvista, jotka jatkavat välitöntä hoitoa. Potilas ei yksinkertaisesti voi olla tietoinen patogeenisen viruksen olemassaolosta elimistössä, joka puolestaan ​​leviää nopeasti verenkiertoon ja tartuttaa terveitä maksasoluja.
Tällaisen traagisen kohtalon välttämiseksi on suositeltavaa noudattaa kaikkia ennaltaehkäiseviä toimenpiteitä. Tällainen valppaus vähentää merkittävästi sairastumisriskiä ja säästää vakavia terveysongelmia tulevaisuudessa. Seuraavassa on esitetty ennaltaehkäisyn perussäännöt:

• pese kädet kadun jälkeen;
• korkealaatuisen tuoreiden vihannesten ja hedelmien jalostus;
• suorittaa kaikki vuosittaisessa kalenterisuunnitelmassa määritellyt profylaktiset rokotukset;
• valikoiva asenne seksikumppaneisiin;
• välttää kosketusta sairaiden ihmisten kanssa;
• käytä vain kertakäyttöisiä ruiskuja ja ole erityisen tarkkaavainen verensiirtoasemilla.

On myös suositeltavaa säännöllisesti (kuuden kuukauden välein) lahjoittaa veren hepatiittia varmistaakseen, että virus ei tunkeudu kehoon eikä saastuta kerran terveitä maksasoluja. Jos diagnoosi määritetään, sen on tultava välittömästi lääkärin tilille ja noudatettava kaikkia asiantuntijan suosituksia.

Julkaisun tekijä:
Syropyatov Sergey Nikolaevich
Koulutus: Rostovin valtion lääketieteellinen yliopisto (Rostovin lääketieteellinen yliopisto), gastroenterologian ja endoskoopin osasto.
gastroenterologist
Lääketieteen tohtori

ELISA-menetelmä hepatiitin havaitsemiseksi

Nykyaikainen lääketiede tunnetaan monista maksasairauksista. HCV (virus-hepatiitti C) on yksi yleisimmistä ja vaarallisimmista, koska tämä infektio kehittyy usein asymptomaattisesti ja johtaa kriittisiin komplikaatioihin, jopa kuolemaan. Siksi taudin oikea-aikainen diagnosointi, joka suoritetaan käyttäen erilaisia ​​menetelmiä, mukaan lukien entsyymiin liitetty immunosorbenttimääritys (ELISA) viruksen vasta-aineiden havaitsemiseksi veressä, on ensiarvoisen tärkeää.

Ilmoitus HCV-infektiosta hepatiitin diagnosoinnissa

Hepatiitti C: n (HCV-infektio) havaitsemiseksi käytetyissä laboratoriotutkimuksissa käytetään kahta eri menetelmää:

1. Serologinen, joka perustuu C-hepatiittiviruksen vasta-aineiden havaitsemiseen (anti-HCV), jota kutsutaan myös ELISA: ksi (entsyymiin liitetty immunosorbenttimääritys). Sen tarkoituksena on havaita hepatiitti C: n seulontaan ja diagnosointiin käytetyt anti-HCV (IgM- ja IgG-markkerit). Molemmat markkerit voidaan havaita veressä (plasmassa) eri yhdistelmissä, mikä edellyttää asianmukaista kliinistä tulkintaa. Anti-HCV: n läsnäolon varmistamiseksi suoritetaan RIBA (rekombinantti immunoblot) -testi.
2. Molekyylibiologinen, jonka tavoitteena on RNA-viruksen havaitseminen. HCV-RNA-testi on määrätty seuraaville potilasryhmille:
   • tunnistettu anti-HCV;
   • ilman havaittua anti-HCV: tä, mutta vakiintuneilla epidemiologisilla ja kliinisillä tiedoilla, jotka edellyttävät HCV: n akuutin muodon poissulkemista.

Viruksen RNA voidaan havaita veressä jo 14 vuorokautta infektion jälkeen, eli ennen kuin anti-HCV esiintyy ensimmäisten 2-3 kuukauden aikana.

Diagnoosin lopulliseksi vahvistamiseksi (varsinkin kun havaitaan vain yksi HCV-infektion kahdesta markkerista) asiantuntijat suosittelevat, että tietyn ajan kuluttua on suoritettava toistuvat HCV- ja HCV-RNA-testit.

Hepatiitin havaitseminen ELISA: lla

Viruksen hepatiitin varhaisen diagnoosin, erityisesti oireettomien, anikteristen muotojen, toteuttamiseksi seerumissa, havaitaan virusproteiinien (antigeenien) tai niiden vasta-aineiden (joita tuottaa immuunijärjestelmä, kun virukset tulevat elimistöön) läsnäolo entsyymiin sitoutuneen immunosorbenttimäärityksen (ELISA) avulla. Tämä on immunologisen diagnoosin yleismaailmallinen menetelmä, jonka ydin on "antigeeni-vasta-aineen" vuorovaikutuksen tutkiminen. Sitä käytetään laajalti monissa maailman maissa.

Hepatiitin määrittäminen ELISA: n avulla mahdollistaa paitsi täsmällisen diagnoosin luomisen myös taudin luonteen määrittämisen, sekä toimivaltaisen ja tehokkaan hoidon perinteisten lääkkeiden (interferoni, ribaviriini), suoran vaikutuksen omaavien lääkkeiden (Sofosbuvir, Daclatasvir) ja intialaisten ja kiinalaisten tuotantojen geneeristen lääkkeiden avulla.

Viruksen hepatiitin diagnosointia ELISA-menetelmällä täydennetään mahdollisuuksien mukaan PCR: llä (polymeraasiketjureaktio), jonka avulla voidaan määrittää hepatiitti-virusten esiintyminen RNA: ssa.

Kuinka tarkka entsyymi-immunomääritysmenetelmä on

Asiantuntijan arvioiden mukaan ELISA-menetelmän tarkkuus on 95%, eli 95: stä 100 potilaasta, jotka käyttävät entsyymi-immunomääritystä, HCV-vasta-aineiden läsnäolo ja määrä - IgM ja IgG voidaan havaita veressä. Jos tulos on positiivinen, on mahdollista diagnosoida HCV: n kosketus elimistöön (ei itse virus, nimittäin vasta-aineiden läsnäolo veressä siihen, joka voi olla seurausta jo siirretystä taudista).

Huolimatta entsyymiin liitetyn immunosorbenttimäärityksen (ELISA) suuresta herkkyydestä, 40%: lla potilaista, joilla on positiivinen tulos, virus ei ehkä havaita, mikä osoittaa epäilyttävän tai väärän positiivisen tuloksen.

ELISA-tulosten oikeellisuuden varmistamiseksi RIBA-menetelmää (rekombinanttinen immunoblottaus) käytetään tarkemmin tutkimaan HCV-vasta-aineiden havaitsemista.

Anti-NCV-ytötesti

Tehokkaissa tutkimuksissa hepatiitti-virusten vasta-aineiden läsnäolon määrittämiseksi sisältyy anti-HCV-ydin, jota käytetään vahvistustestinä, kun saavutetaan "epävarmat" tulokset.

Jos anti-HCV-ydin havaitaan seerumissa laimennoksella 1: 1000, positiivinen tulos on todennäköisesti diagnosoitu, eli sairaus on läsnä.

Jos näytteet laimennettuna 1: 1000 ovat negatiivisia, laimennoksella 1: 200 tarvitaan positiivisia tutkimuksia viruksen RNA: n läsnäolosta. Tällöin ei todennäköisesti ole HCV-infektiota.

On tärkeää ymmärtää, että HCV: n kroonisissa muodoissa havaitaan jatkuvasti vasta-aineita, ja viruksen eliminaation aikana (poistuminen kehon soluista) ne säilyvät 4–8 vuotta tai kauemmin. Siksi anti-HCV: n läsnäolo ei aina osoita kehon infektiota eikä salli objektiivisten johtopäätösten tekemistä prosessin aktiivisuudesta, jotta saadaan tarkkoja tietoja viruksen kuormituksesta, maksavaurion asteesta, infektion kestosta ja akuuttien ja kroonisten sairauksien eroista, joten suositellaan käytettäväksi eri HCV-vasta-aineiden spektrin määritelmää peptidit. On myös tärkeää seurata niiden määrällistä ja laadullista dynamiikkaa.

ELISA-analyysi - HbsAg: n seulonnasta kompleksiseen diagnostiikkaan

Nykyaikaisen teknologian käyttöönotolla lääketieteessä kasvavat immuunikemiallisten diagnostisten menetelmien mahdollisuudet, jotka pystyvät tunnistamaan taudin nopeasti ja tarkasti, kun muut menetelmät ovat voimattomia. Ymmärtäminen, että hepatiitti B-virus pystyy olemaan elimistössä hyvin alhaisessa pitoisuudessa, jossa sitä ei voida havaita jopa sellaisella luotettavalla menetelmällä kuin PCR, tekee tarpeelliseksi ottaa uusi ilmi tämän taudin diagnosoinnin ongelmaan ja ymmärtää immunomäärityksen mahdollisuudet.

Tässä aineistossa analysoimme yksityiskohtaisesti kaiken tämän laboratoriotutkimuksen. Opit mitä entsyymi-immunomääritys on ja miten se suoritetaan, mitä Australian antigeeni on ja miten se määritetään, mitä ymmärrettäviä lyhenteitä Hbs ag, Hbcor, keskimäärin ja niiden roolia analyysin salaamisessa, sekä saada hyödyllistä ja mielenkiintoista tietoa.

Artikkelin sisältö:

Yleistä tietoa ELISAsta

ELISA (lyhennetty ELISA) on laboratorion diagnostiikkamenetelmä, joka voi havaita sekä antigeenejä että vasta-aineita useista eri infektioista, mukaan lukien hepatiitti B. Nykyiset tiedot viruksen ominaisuuksista ja kehon immuunivasteen ominaisuuksista mahdollistavat infektion ilmaisemisen, mutta myös sen tunnistamisen rokotuksen tehokkuus ja hoidon tehokkuus.

Entsyymi-immunomäärityksen ydin

ELISA perustuu "antigeeni-vasta-aine" -reaktioon tai pikemminkin sen ominaisuuksiin.

Vastauksena vieraan aineen (antigeenin), joka on erityisesti viruksen proteiineihin, invaasioon keho tuottaa suojaavia proteiineja - vasta-aineita. Vasta-aineet tulevat kompleksiseen reaktioon antigeenin kanssa estäen sen aktiivisuuden.

Puhumme lisää jäljempänä olevista antigeeneistä ja vasta-aineista, mutta nyt huomautamme, että jokaiselle antigeenille on tiukasti yksilöllisiä tai lääkärit sanovat homologisia vasta-aineita. Näin ollen, jos haluamme havaita tietyn antigeenin veressä, käytämme diagnostista tablettia, jossa on siihen vasta-aineita. Jos veressä on antigeeni, se reagoi vasta-aineiden kanssa, jotka voidaan havaita eri tavoin. Ja päinvastoin. Jos haluamme löytää vasta-aineita, tarvitsemme tabletin, jossa on sopiva antigeeni.

Useimmiten karhun diagnostinen arvo on vain vasta-aineet, joiden avulla voit diagnosoida lähes minkä tahansa infektion. B-hepatiittiviruksen erityispiirteenä on kuitenkin se, että diagnoosin tärkeimmässä asemassa on yksi antigeeneistä - Australian antigeeni.

Miten IFA on

Tarkastellaan tyypillistä ELISA-menetelmää tiettyä esimerkkiä varten, kun haluat tunnistaa patogeenin vasta-aineet.

Diagnostiikkaan käytetään tablettia, jossa on 96 kuoppaa, jotka on esitäytetty vastaavalla antigeenillä. Lisäksi menettely on seuraava:

seerumia levitetään kaikille soluille;

homologiset vasta-aineet reagoivat antigeenin kanssa ja kiinnittyvät levylle;

tabletin pesu, irrottamattomien vasta-aineiden poistaminen;

sitten soluihin lisätään entsymaattinen leima - aine, joka reagoi vasta-aineiden kanssa ja aiheuttaa solun sisällön värjäytymisen.

Tämä on standardi ELISA-menetelmä, jossa on värjäys, jota käytetään esimerkiksi immunokromatografisissa testiliuskoissa.

ELISA ei rajoitu vasta-aineiden tai patogeenin antigeenien kvalitatiiviseen määritykseen. Mitä enemmän vasta-aineita on tabletin soluissa, sitä intensiivisempi on värjätty liuos. Verrattuna sen optiseen tiheyteen ohjauksen kanssa, nykyaikaiset laitteet voivat laskea melko tarkasti vasta-aineiden pitoisuuden tilavuusyksikköä kohti. Täten suoritetaan kvantitatiivinen ELISA, mittausmitta, jolla useimmiten ovat optisen tiheyden yksiköt (EOP).

Immunokemiluminesenssianalyysi

Nykyisin on olemassa useita kymmeniä ELISA-tyyppejä, joista kullakin on edullinen soveltamisala. B-hepatiitin diagnosoinnissa suosituin on immunokemiluminoiva analyysi.

Tämän analyysin entsymaattinen etiketti ei ole kromatiineja, kuten tavallisessa ELISA: ssa, vaan erityisaineita - fosforeja, jotka aiheuttavat kompleksin hehkua ultraviolettivalossa.

Erikoislaitteen luminometrin avulla voit määrittää tarkasti päästötason ja sen seurauksena halutun aineen pitoisuuden.

ELISA-menetelmien avulla määritetään lähes kaikki hepatiitti B -viruksen antigeenit ja niiden vasta-aineet.

B-hepatiittiviruksen antigeenit: Hbs, Hbe ja Hbc

Termi antigeeni (antigeeni) on peräisin kahdesta englanninkielisestä sanasta: vasta-aine - vasta-aine ja generaattori - valmistaja. Siten antigeenin alla ymmärretään mikä tahansa aine, joka aiheuttaa vasta-aineiden muodostumisen kehoon. Yleisimmät antigeenit ovat proteiiniyhdisteitä.

Nykyään tiedetään kolme hepatiitti B-viruksen antigeeniä: hbsag, hbc ja hbe.

Australian antigeeni

Proteiinia, joka on osa patogeeni- hepatiitti B: n ulompaa kuoria, havaittiin kauan ennen viruksen löytämistä. Tämä antigeeni sai nimensä, koska se tunnistettiin ensin Australian alkuperäisistä asukkaista. Aluksi proteiinia ei kuitenkaan pidetty antigeeninä, vaan alkuperäiskansojen keskuudessa täysin normaali osa verta, ja tietoisuus sen yhteydestä maksasairauksiin tuli hieman myöhemmin.

Antigeenin pitkäaikainen säilyttäminen veressä ja vasta-aineiden puuttuminen viittaavat mahdollisuuteen muodostaa HBeAg-positiivinen krooninen hepatiitti B

Nykyään ammattikirjallisuudessa nimitystä "Australian antigen" ei käytännössä löydetä, ja sen on korvannut kansainvälinen lyhenne - HbsAg (hepatiitti b -pintaantigeeni - hepatiitti B -pinnan antigeeni). Lisäksi löydät lyhenteitä hbs-antigeeni tai vain hbs. Kaikki näistä lyhenteistä ovat hyväksyttäviä ja niitä voidaan täydentää tallentamalla HBV tai HBV - hepatiitti B-virus (hepatiitti b-virus).

B-hepatiittiviruksen pinta-antigeenillä on yksi merkittävä ominaisuus, joka tekee siitä välttämättömän diagnostisen markkerin - sen pitoisuus veressä voi nousta erittäin korkeaksi, jopa puoleen milligrammaan veren millilitraa kohti. Tämä johtuu siitä, että vain pieni osa uusista HBsAg: sta, jotka muodostuvat B-hepatiittiviruksen lisääntymisen aikana, siirtyvät uusien viruspartikkeleiden kalvojen rakentamiseen ja loput - vapaasti kiertämään veressä. Tämän seurauksena veren hiukkasten lukumäärä voi ylittää virionien määrän satoja tuhansia kertoja.

Tämä ominaisuus tekee Australian antigeenistä tärkeimmän markkerin hepatiitti B: n seulontadiagnoosissa, joka löytyy verestä jo 4-6 viikkoa infektion jälkeen. Vasta-ainemuodossa pinta-antigeeni korvataan asteittain niiden avulla. Jos 6 kuukauden kuluttua HBsAg jatkuu, tämä osoittaa infektion siirtymistä krooniseen muotoon.

Äskettäin, kun hbs hbv: n konsentraatio oli mahdollista määrittää, sen rooli diagnoosissa on kasvanut vieläkin enemmän, koska antigeenitason perusteella voidaan erottaa krooninen B-hepatiitti (HBV) terveestä kantajan tilasta sekä seurata hoidon tehokkuutta.

Ydinantigeenit

Viruksen ytimessä - nukleokapsidissa - on proteiineja, jotka kontrolloivat HBcoreAg- ja HBeAg-viruksen lisääntymistä.

HBcoreAg, jota voidaan kutsua myös HBCore-antigeeniksi, hbc: ksi tai ydinantigeeniksi, voidaan löytää vain maksakudoksissa suoraan hepatosyyttien ytimissä. Tätä antigeeniä ei havaita veressä eikä sillä ole diagnostista arvoa.

Hepatiittiviruksen rakenne

HBeAg (HBe, HBprecoreAg) - päinvastoin, on tärkeä rooli diagnoosissa. HBeAg ja HBcoreAg ovat lähisukulaisia. Niillä on suuri rakenteen samankaltaisuus ja ne eroavat pääasiassa molekyylien paikkatilanteesta. Toisin kuin HBcore, HBe ei ole osa nukleokapsidin seinää, ja se kiertää vapaasti veressä.

HBe: n rooli infektioprosessissa ei ole riittävän selvä, mutta sen käyttäytymisen erityispiirteet ja suhde tartuntaprosessin kulkuun on jo tutkittu riittävästi. HBeAg ilmaisee viruksen aktiivisen lisääntymisen ja mahdollistaa luotettavan CHB-HBeAg-positiivisen tai HBeAg-negatiivisen vaiheen määrittämisen.

HBe voidaan havaita veressä jo akuutin B-hepatiittiviruksen (HBV) inkubointiaikana, kun taas korkea HBeAg-pitoisuus kolmen viikon ajan osoittaa todennäköisesti kroonisen prosessin uhkan. HBe: n pitoisuus liittyy suoraan Dane-hiukkasten pitoisuuteen (ns. Hepatiitti B-viruspartikkeleihin) - mitä suurempi HBe-määrä on, sitä suurempi on HBV-DNA: n pitoisuus veressä.

HBeAg on taudin tarttuvuuden merkittävä merkki. HBeAg-positiivisten potilaiden veri on paljon tarttuvampi kuin HBeAg-negatiivinen. Esimerkiksi raskaana olevilla naisilla, jotka ovat positiivisia HBe: lle ja Hbs: lle, tartunnan leviämisen todennäköisyys lapselle on 50%, kun taas tällaisen tapahtuman todennäköisyys HBe-negatiivisissa, mutta positiivisten äitien Hbs: ssä on 10-30%.

Hbe määrittää kroonisen hepatiitin kulun. HBeAg-positiivisella kroonisella hepatiitti B: llä on paljon epäsuotuisampaa ennustetta kirroosin kehittymisen kannalta.

Se on luultavasti kaikki mitä sinun tarvitsee tietää HBV-antigeeneistä, ja siirrymme toiseen B-hepatiittimerkkiryhmään - vasta-aineisiin.

Mitä hepatiitti C: n positiivinen tai negatiivinen YVA-tulos tarkoittaa?

Jotta voidaan määrittää tarkasti hepatiitin tyyppi alustavan diagnoosin jälkeen, ennustaa taudin kulkua, sen kehittämisen vaiheen määrittämiseksi käytetään erilaisia ​​serologisia tutkimuksia. Tarkimmat tiedot saadaan entsyymi-immunomäärityksen jälkeen. Käyttämällä ELISA-hepatiitti C: tä, joka diagnosoitiin 95%: ssa tapauksista. Tämä analyysi mahdollistaa C-hepatiitti-virustentorjunnan (HCV-virustorjunta) vasta-aineiden havaitsemisen ja arvioi paitsi patologisen prosessin aktiivisuuden astetta, myös hoitavan lääkärin määräämän ja hänen valvonnassaan suorittaman antiviraalisen hoidon tehokkuuden.

Kun tarvitaan tutkimusta ja sen ominaisuuksia

C-hepatiitti on tämän taudin vaarallisin tyyppi, koska sillä on pitkä piilevä (piilevä) aika ja vaaralliset seuraukset. Jotta vältettäisiin oikean ja oikea-aikaisen diagnoosin ulkonäkö ja kehittyminen, sen yksi informatiivisimmista menetelmistä on tunnustettu immunomääritys.

On mahdollista vahvistaa HCV-infektion esiintyminen potilaan veressä serologisten markkereiden avulla, ja analyysi, joka perustuu rakenteellisten ja ei-rakenteellisten viruspeptidien kompleksiin, mahdollistaa mahdollisimman täydellisten ja luotettavien tietojen saamisen vasta-aineiden olemassaolosta. Terveillä ihmisillä potilaan veressä olevat C-hepatiittiviruksen vasta-aineet puuttuvat, ja niiden havaitseminen osoittaa patogeenin esiintymisen ja patologisen prosessin kehittymisen.

Tutkimuksen aikana asiantuntijat tunnistavat IgM- ja IgG-kokonaisvasta-aineet, jotka liittyvät suoraan HCV: n rakenteellisiin ja ei-rakenteellisiin proteiineihin. Tämän tutkimuksen tekeminen antaa meille mahdollisuuden tunnistaa C-hepatiittiviruksella infektoituneet potilaat taudin varhaisessa vaiheessa, ja kokonaisvasta-aineiden esiintyminen potilaan veressä osoittaa sairauden tai aikaisemman infektion alkamisen.

Taudin alkamista ilmaisee IgM-luokan vasta-aineiden läsnäolo ja tyypin C hepatiitti voidaan arvioida havaittujen IgG-luokan vasta-aineiden perusteella. Niistä tulee vahvistuminen toipumiseen (taudin viimeinen vaihe), ja tänä aikana on ominaista sairastuneiden elinten anatoominen ja toiminnallinen elpyminen.

Ajoissa suoritettu ELISA (ELISA) mahdollistaa patologisen prosessin tunnistamisen varhaisessa kehitysvaiheessa, taudin diagnosoimiseksi suurella tarkkuudella ja nopean elpymisen mahdollisuuden lisäämiseksi. ELISA-testin avulla voidaan määrittää paitsi viruksen läsnäolo myös erityisten virustorjunta-vasta-aineiden määrä.

1. Naiset raskauden aikana rekisteröidessään synnytystä edeltävään klinikaan.
2. Potilaat, joilla on akuutin tai kroonisen hepatiitin oireita.
3. Lääketieteen ammattilaiset, jotka ovat jatkuvasti yhteydessä biologisiin materiaaleihin.
4. Potilaat, joilla on AIDS-diagnoosi.
5. Huumeriippuvaiset kansalaiset.
6. Potilaat, joilla on alkoholismia, ja ne, jotka johtavat assosiaalista elämäntapaa.

Lähettäminen ELISA-testiin (entsyymi-immunomääritys) ja vastaanotto lainvalvontaviranomaisille tai julkisten palvelujen työntekijöille. ELISA-menetelmän tarve tapahtuu, jos epäilet maksan toiminnallisuuden rikkomista tai kyseenalaista tietoa elimen tilasta ultraäänen jälkeen. Lääkäri voi antaa potilaalle viittauksen ELISA-verikokeeseen, jos viimeksi mainitulle tehdään monimutkainen kirurginen toimenpide. Jos nainen (varsinkin yli 30-vuotias) suunnittelee raskautta, ja verikokeessa havaitaan kohonneita bilirubiini- tai transferaasiarvoja (ALT, AST).

Spesifisiä anti-virus-IgG-vasta-aineita on havaittu useita vuosia. Heidän keskittymisensä vähenee vähitellen, mikä vahvistaa positiivisen dynamiikan. Kuten krooninen C-hepatiitti, tässä tapauksessa HCV-vasta-aineiden kokonaismäärät eivät muutu. Tarkka diagnoosi perustuu IgM-vasta-aineiden tason määrittämiseen.

C-hepatiitin kulku riippuu taudin kehittymistä aiheuttaneen viruksen genotyypistä. 11 modernia lääketieteen lajia tunnetaan. Vaikeimmissa tilanteissa tartunta useilla viruksen genotyypeillä on mahdollista, ja yksi niistä osoittautuu aina hallitsevaksi. Vain tarkka diagnoosi auttaa valitsemaan tehokkaimmat lääkkeet tehokkaaseen hoitoon, valitsemaan niiden annoksen ja asettamaan terapeuttisten toimenpiteiden keston.

Tutkimustulosten arviointi

Epäillyn hepatiitti C: n diagnosoimiseksi ja ohjeellisen informaation saamiseksi patogeenin määrästä ja laadusta suoritetaan entsyymiin liittyvä immunosorbenttimääritys (ELISA), jonka aikana asiantuntijat saavat vahvistuksen viruksen läsnäolosta elimistössä ja voivat arvioida sen aktiivisuutta.

Tämän tutkimuksen avulla voimme tehdä johtopäätöksiä:

• viruksen kuormitus;
• kroonisen prosessin kehittymisen riski;
• HCV-RNA-molekyylin lisääntymisaktiivisuus (replikaatio);
• patologisen prosessin kesto;
• maksavaurion aste.

Lisäksi arvioidaan taudin riski krooniseksi. Tunnistettu ELISA-virustentorjunnan avulla HCV-vasta-aineet osoittavat viruksen replikaation. Lopulliset tulokset edellyttävät tarkempaa tutkimusta.

Entsyymi-immunomäärityksen tuloksen kvalitatiivinen arviointi ilmaistaan ​​positiivisena tai negatiivisena tuloksena. ELISA mahdollistaa hepatiitti C: n havaitsemisen taudin kehittymisen varhaisessa vaiheessa sekä taudin kulun anisterisessa muodossa.

Analyysillä on tiettyjä etuja, kuten:

1. Laadullisten ja määrällisten indikaattoreiden tarkkuus.
2. Opintojakson vähimmäisaika.
3. Vaiheittainen testi.

Entsyymi-immunomääritys on yksi tutkimuksista, jotka erottuvat suurella tarkkuudella, mutta kaikista eduista huolimatta joissakin tapauksissa se ei mahdollista ihmiskehossa olevan patogeenin tunnistamista.

Tutkimusta varten laboratorioavustaja ottaa potilaan laskimoveren ja sijoittaa sen erityisiin säiliöihin. Tietyn ajan kuluttua antigeenit (vieraat mikro-organismit) on kiinnitetty astian seiniin. Asiantuntija lisää immunoglobuliineja (vasta-aineita) astiaan ja etsii immuunivasteen.

Saatuja tuloksia verrataan erityisesti kootun taulukon tietoihin. Tulos arvioidaan seuraavasti:

Positiivinen, osoittaen taudin akuutin muodon, jos IgA: n, IgG: n, IgM: n vasta-aineiden läsnäolo määritetään verikokeessa.

Negatiivinen - kaikkia kolmea vasta-ainetyyppiä ei havaittu.

Väärä positiivinen ELISA-tulos on positiivinen, mutta ei vahvistettu PCR: n jälkeen (polymeraasiketjureaktio).

Epäselvä - veren merkkiaineita ei havaita C-hepatiitin läsnä ollessa. Tämä on mahdollista liian varhaisessa diagnoosissa. Tarvitaan toistuva analyysi 2-3 viikon kuluttua. Tarkkaa diagnoosia varten tee PCR-analyysi.

Analyysin virheellinen negatiivinen tulos on mahdollista potilailla, jotka käyttävät lääkkeitä, joilla on estävä vaikutus kehon puolustusjärjestelmään.

Sekä virheelliset positiiviset että väärät negatiiviset tulokset ovat mahdollisia useista syistä. Ensinnäkin se on minimaalinen viruksen kuormitus taudin varhaisessa vaiheessa. Yhtä tärkeää on potilaan immuunijärjestelmän tila ja kehon yksilölliset ominaisuudet. Tutkimuksen tulokset vaikuttavat merkittävästi lääkkeiden antamiseen immunosuppressanttien joukosta.

On mahdotonta olla täysin varma entsyymi-immunomäärityksen tuloksen tarkkuudesta, jos potilas on nainen raskauden tilassa. Väärät tulokset ovat mahdollisia tapauksissa, joissa analyysi suoritetaan potilaille, jotka kärsivät autoimmuunisairaudet, onkologiset sairaudet, joilla on hyvänlaatuisia kasvaimia.

Lisätutkimuksia tehdään, jos potilas on äskettäin kärsinyt vakavasta tartuntataudista, hänellä on diagnosoitu aineenvaihduntahäiriö tai endokriinisen järjestelmän toimintahäiriö. Jos veren koostumus kohosi hepariinin tasoja tai pienentää hivenaineita merkittävästi.

Analyysin tarkkuutta voidaan lisätä noudattamalla olemassa olevia sääntöjä, jotka koskevat sen valmistelua:

1. Veri luovutetaan vain tyhjään vatsaan. Viimeinen ateria on sallittu vähintään 8-10 tuntia ennen materiaalin keräämistä.
2. Illalla ennen analyysia on kiellettävä syömästä rasvaisia, paistettuja, mausteisia, savustettuja tuotteita ja ruokia.
3. Ei voi puhua alkoholin käytöstä.
4. On parempi lopettaa tupakointi päivä ennen verenluovutusta.

Entsyymiin liittyvää immunosorbenttimääritystä voidaan tehdä vain niille potilaille, joilla ei tällä hetkellä ole vilustumista, tulehduksellisia tai tarttuvia tauteja, eivät valittaa epäpätevyydestä.

Lueteltujen sääntöjen ja vaatimusten rikkominen johtaa siihen, että analyysin tulos arvioidaan vääräksi positiiviseksi. Tilanne kehittyy 15-20 prosentissa tapauksista. Täydellisen luottamuksen saamiseksi lääkärit kuitenkin lähettävät potilaita lisätutkimuksiin, joiden aikana heidän on luovutettava verta PCR: lle.

Polymeraasiketjureaktio

Diagnoosi ei ole mahdollista vain ELISA-analyysin tulosten perusteella. Vasta-aineiden läsnäolo ei ole todiste patogeenisen viruksen esiintymisestä kehossa tutkimuksen aikana. Virheellinen testaus voi aiheuttaa potilaan hermoston hajoamisen tai jopa akuutin reaktion. ELISA: n tuloksiin perustuva diagnoosi ei ole tarkka. Tarvitaan lisää tutkimusta, jonka tulokset antavat lääkäreiden lopullisen tuomion.

On tärkeää muistaa, että vääriä positiivisia testituloksia on mahdollista ihmisillä, jotka kärsivät tällä hetkellä muista tartuntatauteista, mutta niiden immuunijärjestelmä ei vastannut oikein patogeenien tai virusten tunkeutumiseen kehoon.

C-hepatiitin diagnosointi mahdollistaa useita laboratoriokokeita, jotka ovat erityinen paikka, johon kuuluu entsyymiin liitetty immunosorbenttimääritys (ELISA). Indikaattoreiden laadullinen arviointi määritellään positiiviseksi tai negatiiviseksi tulokseksi. B-hepatiittiviruksen puuttuminen potilaan verestä on normi, mutta joissakin tapauksissa asiantuntijat toteavat tutkimuksen jälkeen, että joidenkin RNA-fragmenttien (ribonukleiinihappo) merkityksetön pitoisuus on todettu biologisessa materiaalissa. Tunnista ne PCR: llä (polymeraasiketjureaktio).

Tämä verikoe mahdollistaa hepatiitti C: n aiheuttajan tunnistamisen taudin kehittymisen alkuvaiheessa ja diagnoosin tekemisen tarkkuudella. Tutkimus perustuu siihen, että viruksilla on niiden rakenteessa DNA-molekyylejä (B-hepatiitti) tai RNA: ta (hepatiitti C).

PCR-analyysin aikana potilaan verinäytteiden erityiskäsittelyllä:

• lisätä nukleiinihappomolekyylien pitoisuutta;
• määrittää niiden tyyppi;
• taudin tyyppi.

Jos ihmisen veressä on pieni määrä patogeeni-RNA-fragmentteja, ne kaikki havaitaan PCR: llä. Tämä mahdollistaa tarkan diagnoosin tekemisen. Tämän analyysin pääasiallinen ero kaikista muista tutkimusmenetelmistä on 100% tarkkaa diagnoosia.

Tämä analyysi suoritetaan tutkimuksessa raskaana olevien naisten verestä, jotka hakivat synnytystä edeltävään klinikaan rekisteröintiä varten, ja epäilty C-hepatiitti pitkästä piilevästä (piilevästä) ajanjaksosta. PCR on tarpeen tapauksissa, joissa entsyymi-immunomäärityksen jälkeen on saatu epäilyttävä tulos.

Hepatiitti C -virus tässä tilanteessa on potilaan kehossa, mutta ei ole vielä aiheuttanut taudin nopeaa kehittymistä. Tämä on taudin piilevä kulku. Analyysi tehdään melko nopeasti, koska taudinaiheuttajaa ei tarvitse kasvattaa ravinteella käyttämällä tulosta. Suurin ero PCR: n ja entsyymiin sitoutuneen immunosorbenttimäärityksen (ELISA) välillä on se, että tässä tutkimuksessa ei ole sellaista asiaa, joka olisi väärän positiivinen tai epäilyttävä tulos.